示例:
細(xì)胞用FITC-Annexin V / PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)效果圖。
Jurkat細(xì)胞用1μM喜樹(shù)堿(Camptothecin) (左)或未加藥 (右)處理4h,F(xiàn)ITC-Annexin V/PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒染色后,流式細(xì)胞儀熒光檢測(cè)。
Annexin V-FITC單陽(yáng)性細(xì)胞為早期凋亡細(xì)胞,Annexin V-FITC和PI染色雙陽(yáng)性的細(xì)胞為壞死細(xì)胞或者晚期凋亡。PI單染色陽(yáng)性位裸核細(xì)胞。
實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞凋亡情況,檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對(duì)數(shù)坐標(biāo)軸模式備用;
2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類(lèi)似),選取雙陰細(xì)胞群;
3) 在雙陰細(xì)胞門(mén)中,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCS和SSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細(xì)胞碎片,劃出碎片門(mén),應(yīng)用于所有細(xì)胞;
4) 在所有細(xì)胞中,反選碎片門(mén),得到所有細(xì)胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,參照未經(jīng)藥物處理的對(duì)照組,劃出十字門(mén),確定不同群細(xì)胞的比例。