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大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的使用需要特別注意這些
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的使用需要特別注意這些
更新時(shí)間:2022-03-28 | 點(diǎn)擊率:1371
從海馬體中分離出
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞
;海馬體又稱海馬回、海馬區(qū)和大腦海馬體,主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元是海馬體中的主要細(xì)胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內(nèi)臟功能的調(diào)節(jié)。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統(tǒng),在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)和病理生理變化中起重要作用。此外,海馬體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)干細(xì)胞的主要聚集區(qū)。它具有高度有序的層狀結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元分布相對(duì)獨(dú)立的特點(diǎn)。邊界比較清晰,材料容易獲取。因此,海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究人員視為理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細(xì)胞生物學(xué)特性和外源性干擾因子(細(xì)胞因子)影響的有效細(xì)胞模型。已廣泛應(yīng)用于體外神經(jīng)生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究。
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大多數(shù)細(xì)胞只需要用胰蛋白酶潤(rùn)濕洗滌即可。吸收胰蛋白酶后,無法計(jì)算的附著在細(xì)胞表面的殘留微量胰蛋白酶在37度時(shí)一般小于2分鐘,足以消化細(xì)胞(大部分小于1分鐘)。原則上,這些細(xì)胞不應(yīng)與胰蛋白酶一起孵育。連續(xù)通過會(huì)對(duì)細(xì)胞造成很大的傷害。簡(jiǎn)單的程序是PBS洗滌吸收,胰蛋白酶洗滌吸收,然后37度消化。
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞使用要特別注意:(如果使用公共實(shí)驗(yàn)室或接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗體培養(yǎng))
1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基。如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%血清(原瓶培養(yǎng)基連續(xù)使用時(shí)間不得超過72小時(shí));
2、貼壁細(xì)胞在收到當(dāng)天不要立即消化。請(qǐng)更換細(xì)胞溶液,放入培養(yǎng)箱中孵育至次日進(jìn)行消化和繼代培養(yǎng)。請(qǐng)優(yōu)先使用直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行繼代培養(yǎng);
3、簽字時(shí)培養(yǎng)瓶壁破裂、漏水,請(qǐng)及時(shí)拍照記錄并與實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系。
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