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大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞該如何保存和應(yīng)用?
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞該如何保存和應(yīng)用?
更新時間:2022-05-09 | 點擊率:1276
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞
是哺乳動物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種細胞亞群,具有多種分化潛能,可分化為骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC),而且還分泌多種生長因子(如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF)來支持造血。
在骨髓間充質(zhì)細胞的原代培養(yǎng)過程中,可在約24小時內(nèi)發(fā)生貼壁生長。細胞呈圓形、梭形和三角形,生長緩慢。液體交換后細胞增殖明顯,呈梭形為主,形態(tài)多樣。70%-80%可在10-14天融合,達到通過標準。傳代細胞形狀單一,有紡錘形或扁平形,增殖至細胞融合時呈渦旋狀和放射狀排列。
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基特別添加了能有效改善細胞生長狀態(tài)的營養(yǎng)物質(zhì)和特選的優(yōu)質(zhì)胎牛血清,適用于Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)細胞。培養(yǎng)基分裝于小瓶(100~200ml)中使用,瓶口用旋蓋塞緊。根據(jù)細胞生長需要配制相應(yīng)的生長培養(yǎng)基。一般細胞生長培養(yǎng)基為培養(yǎng)基+10%胎牛血清,最后按1%體積分數(shù)加入雙抗體儲存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素終濃度為100u/ml,分別為100u/ml。
客戶可根據(jù)自身需要選擇新鮮或冷凍原代細胞。如為新鮮原代細胞,客戶收到后應(yīng)立即放入CO2細胞培養(yǎng)箱中,靜置2-3H后進行后續(xù)實驗操作。如果是冷凍細胞,客戶應(yīng)立即將細胞放入液氮中,-80℃冰箱或在收到細胞后立即復蘇。這些細胞只能用于科學研究,不能用于臨床。
經(jīng)檢測,大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞具有良好的增殖分化潛能,可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示CD29、CD44、CD105陽性,CD34、CD45陰性。使用干冰進行儲存和運輸。接收細胞時,一些冰已*融化。請立即對細胞進行復蘇和培養(yǎng);如果還有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存。請根據(jù)條件存放細胞。不要將電池置于高溫環(huán)境中。
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