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細(xì)胞學(xué)堂 | 貼壁細(xì)胞6大培養(yǎng)難題原因和解決方法

貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)要貼附于培養(yǎng)（瓶）器皿壁上，細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展，然后開(kāi)始有絲分裂，并很快進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。貼壁細(xì)胞因其培養(yǎng)過(guò)程較為繁瑣，所以培養(yǎng)時(shí)更容易出現(xiàn)問(wèn)題。以下總結(jié)了貼壁細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的6種問(wèn)題，并詳細(xì)介紹原因和解決方法，若培養(yǎng)時(shí)遇到這些情況，可參考對(duì)應(yīng)解決方法處理。01傳代后細(xì)胞全部飄起解決方法：檢查所使用的培養(yǎng)基的顏色是否偏紫色（如圖1），檢查瓶蓋是否透氣，不透氣瓶蓋是否被擰松。圖1.培養(yǎng)基顏色偏紫通常培養(yǎng)基偏堿，顏色就會(huì)偏紫，主要是因?yàn)榕囵B(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸變...

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胎牛血清要怎么用才能有理想效果？

胎牛血清是一種常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，可以提供生長(zhǎng)因子、細(xì)胞黏附蛋白、酶等多種必需物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。在使用時(shí)，需要掌握以下幾個(gè)方面的使用方法。1、正確儲(chǔ)存胎牛血清這是一種易變質(zhì)、易受污染的生物制品，需要在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中注意保持其質(zhì)量和純度。儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)放置于-20℃以下的冰箱中，避免熱量和濕度影響其質(zhì)量。使用前應(yīng)先將血清緩慢解凍，并進(jìn)行消毒處理，以確保其純度和質(zhì)量。2、正確添加在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加血清時(shí)，需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和培養(yǎng)基配方等因素，選擇正確的添加量和添加時(shí)間。添加...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)異常解決方法

懸浮細(xì)胞大多胞體呈圓形，不貼于支持物上，呈懸浮生長(zhǎng)，容易大量繁殖。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)雖比貼壁細(xì)胞少了消化的步驟，但培養(yǎng)起來(lái)同樣不易。有碎片、形態(tài)改變、生長(zhǎng)速度慢、細(xì)胞貼壁……每一種異常都牽動(dòng)著我們的心。因此本期細(xì)胞學(xué)堂整理了懸浮細(xì)胞收貨和培養(yǎng)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題，并針對(duì)各個(gè)問(wèn)題列出解決辦法，帶你逐個(gè)擊破！運(yùn)輸常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法1碎片多處理方法：懸浮細(xì)胞受到運(yùn)輸或者其他因素導(dǎo)致細(xì)胞損傷時(shí)，容易產(chǎn)生細(xì)胞碎片，碎片可通過(guò)低速離心（800~1000rpm，3min）去除；低速離心同時(shí)也會(huì)丟失細(xì)...

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如何培養(yǎng)原代小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞？

小鼠骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。那么它是如何培育的呢？1、材料成年小鼠4只、胎牛血清、L-DMEM、胰蛋白酶、PBS、Percool細(xì)胞分離液、雙抗、8%碳酸氫鈉溶液。2、儀器倒置顯微鏡、CO2恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、生物顯微鏡、低溫高速離心機(jī)、無(wú)菌操作臺(tái)、血球計(jì)數(shù)板、6孔培養(yǎng)板。3、方法骨髓收集→Percoll密度梯度離心...

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人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于組織工程

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為一個(gè)研究熱點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)和組織工程（特別是在骨、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)等疾病的領(lǐng)域）。作為細(xì)胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究，以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。這是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的增殖能力和免疫調(diào)節(jié)能力，因此被廣泛應(yīng)用于組織工程，細(xì)胞治療和基因治療。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞取自成人的骨髓，其擁有強(qiáng)大的自我更新能力并具有多向分化潛能。干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨...

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大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的研究方法包括哪些？

海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū)。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)中的一個(gè)重要細(xì)胞類(lèi)型，其在學(xué)習(xí)、記憶和認(rèn)知等過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。這是一種典型的多極神經(jīng)元，其細(xì)胞體呈梭形，具有多個(gè)樹(shù)突和一個(gè)軸突。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的樹(shù)突分為原樹(shù)突和側(cè)樹(shù)突兩種，原樹(shù)突通常比側(cè)樹(shù)突長(zhǎng)，且數(shù)量較少。軸突起始于細(xì)胞體的一個(gè)區(qū)域，向外延伸并分支成多個(gè)終末分支，形成神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。大鼠海馬神經(jīng)元...

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雞卵泡顆粒細(xì)胞的使用

雞卵泡顆粒細(xì)胞的用途：該細(xì)胞分離自雞卵泡組織；雞卵泡顆粒細(xì)胞培養(yǎng)可保持雞卵泡顆粒細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞卵泡顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于雞卵泡顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。雞卵泡顆粒細(xì)胞的使用：1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。2、待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。3、細(xì)胞傳代：1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 脫落的293T細(xì)胞如何恢復(fù)正常

293T[HEK-293T](人胚腎細(xì)胞)是293[HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。該細(xì)胞廣泛應(yīng)用于病毒包裝，因其比較容易轉(zhuǎn)染，也是常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。圖1.293T正常生長(zhǎng)圖片該細(xì)胞因?yàn)橘N壁松散，若購(gòu)買(mǎi)常溫細(xì)胞，收貨時(shí)有可能大部分細(xì)胞脫離培養(yǎng)瓶壁，顯微鏡下找不到細(xì)胞，只能看到肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞團(tuán)，是正?，F(xiàn)象（如圖2）。圖2.293T收貨聚團(tuán)（圖由客戶(hù)提供，僅供學(xué)習(xí)參考）參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：1收到細(xì)胞后請(qǐng)...

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