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大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程

體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞細(xì)胞周期有限；建議使用與procell配套的專用生長培養(yǎng)基和正確的操作方法進(jìn)行培養(yǎng)，以保證細(xì)胞處于理想培養(yǎng)狀態(tài)。procell實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化、神經(jīng)元特異性培養(yǎng)基培養(yǎng)、篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制制備。細(xì)胞總數(shù)約為5×105個(gè)細(xì)胞/瓶。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和傳代流程（請嚴(yán)格按照無菌操作）：1、從原培養(yǎng)瓶中吸出培養(yǎng)基，用PBS緩沖液潤濕細(xì)胞兩次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細(xì)胞（注意消化時(shí)間，一般控制在1-2min內(nèi)）；2...

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收到293 [HEK-293]細(xì)胞后如何操作？

293[HEK-293]細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞，293[HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出，293[HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主...

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直播答疑 | 普諾賽3月直播：細(xì)胞系由來及鑒定問題

在普諾賽3月30日開播的細(xì)胞培養(yǎng)直播課堂中，有很多同學(xué)提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，并作了詳細(xì)解答。01動(dòng)物細(xì)胞怎么鑒定？要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的以及細(xì)胞類型進(jìn)行選擇。如果是人源細(xì)胞系，并且有文獻(xiàn)或數(shù)據(jù)庫公布對應(yīng)細(xì)胞信息，則進(jìn)行STR鑒定即可；如果使非人源的細(xì)胞系，可以進(jìn)行種屬鑒定，并且附加一個(gè)研究方向相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，部分小鼠細(xì)胞也可以做STR鑒定，但目前數(shù)據(jù)庫不*，很多都沒有匹配數(shù)據(jù)。對于原代細(xì)胞，如果能夠確保取材無誤，僅進(jìn)行特異性指標(biāo)方面的檢測就可以了，方法可采用...

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胎牛血清的儲(chǔ)存和使用都是有講究的

胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基，但不能直接使用。無論是存儲(chǔ)還是使用，都比較復(fù)雜。血清的常規(guī)處理是熱鈍化，即置于56°水浴中30分鐘；其目的是使血清中的補(bǔ)體成分和一些未知的細(xì)胞生長抑制分子失活。實(shí)驗(yàn)表明，大多數(shù)細(xì)胞不需要經(jīng)過正確處理后的熱滅活血清。經(jīng)過這樣的處理，血清只能輕微促進(jìn)細(xì)胞的生長，或者根本沒有作用。即使是高溫處理通常也會(huì)影響血清的質(zhì)量并降低細(xì)胞的生長速度。熱處理過的血清會(huì)顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時(shí)，這些沉淀物，如“小黑點(diǎn)”，常常使研究人員誤認(rèn)為血清被...

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雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟

雞卵泡顆粒細(xì)胞分離、培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟：A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液處死母雞，新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min，打開腹腔，剪取整個(gè)卵巢，小心剝離卵泡(以8-15g為最佳)，置于裝有PBS緩沖液的無菌培養(yǎng)皿中；B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污，漂洗3次；將漂洗干凈的卵泡移入裝有預(yù)冷PBS緩沖液的平皿中，剝凈卵泡外膜、結(jié)締組織及血管網(wǎng)；C.用手術(shù)刀在卵泡表面劃一道1-2cm長的切口(動(dòng)作要快)，釋放卵黃，用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈，剩下的卵泡膜...

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大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法主要有這兩種

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是在哺乳動(dòng)物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群，具有多種分化潛能，可分化成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細(xì)胞。它們不僅機(jī)械地支持骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢特性，定期更換溶液去除非貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化和擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分的不同比例，分離出單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁...

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3月高分文獻(xiàn)精選：普諾賽助力各類疾病研究

截止至2022年3月，使用普諾賽產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)，總發(fā)表篇數(shù)達(dá)3000+，單篇最高影響因子達(dá)39.849。本期我們精選5篇影響因子在15分以上的文獻(xiàn)，進(jìn)行分享。其中，使用普諾賽產(chǎn)品MC3T3-E1細(xì)胞和HOS細(xì)胞發(fā)表于知-名期刊MaterialsToday的文章，單篇影響因子高達(dá)31.041。正是因?yàn)樵絹碓蕉嘌芯繄F(tuán)隊(duì)的選擇，我們對產(chǎn)品質(zhì)量從未松懈，期待為您帶來更好的體驗(yàn)！高分文獻(xiàn)精選01用于骨肉瘤臨床治療和組織再生的新型光熱控制多功能支架Anovelphotothermally...

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大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的使用需要特別注意這些

從海馬體中分離出大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞；海馬體又稱海馬回、海馬區(qū)和大腦海馬體，主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元是海馬體中的主要細(xì)胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內(nèi)臟功能的調(diào)節(jié)。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)和病理生理變化中起重要作用。此外，海馬體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)干細(xì)胞的主要聚集區(qū)。它具有高度有序的層狀結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元分布相對獨(dú)立的特點(diǎn)。邊界比較清晰，材料容易獲取。因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被基礎(chǔ)...

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